Simultaneous Analysis of Antiarrhythmic Drugs in Human Blood Plasma Using the Fully Automated Sample Preparation LC/MS/MS System

Význam tématu

Udržování optimální koncentrace antiarytmik v krvi pacientů je klíčové pro zajištění účinné a bezpečné terapie.
Automatizace předzpracování vzorků v kombinaci s LC/MS/MS umožňuje rychlejší a reprodukovatelnou analýzu terapeuticky náročných látek.

Cíle a přehled studie

Článek popisuje vývoj workflow pro simultánní analýzu šesti antiarytmik a jejich metabolitů v lidské krevní plazmě.
Cílem je zkrácení celkové doby analýzy prostřednictvím plně automatizovaného předzpracování vzorků s jednotkou CLAM-2000 a LC/MS/MS systémem.

Použitá metodika a instrumentace

• Zařízení: CLAM-2000 (automatické předzpracování), Nexera (UHPLC), LCMS-8060 (analýza); pro komparativní testy LCMS-8040.
• Příprava vzorku: 15 μL plazmy + 285 μL acetonitrilu, míchání 120 s při 1900 rpm, filtrace 90 s.
• Kolona: Shimadzu GLC Mastro C18, 50 mm × 2,1 mm, 3 μm; mobilní fáze: 0,1 % kyselina mravenčí/voda (A) a 0,1 % kyselina mravenčí/methanol (B); gradient 10 %→100 % B (0–3,5 min).
• Detekce: ESI(+) MRM, injekční objem 0,2 μL, iontová síla 2,0 kV, teploty rozhraní 300 °C, DL 250 °C, ohřev 400 °C.

Hlavní výsledky a diskuse

• Celkový cyklus analýzy včetně předzpracování činí 7 min na vzorek.
• Linearita pro všech šest látek R2 > 0,998, LLOQ 50–100 ng/mL, přesnost 98–104 %, preciznost RSD < 5 %.
• Test carry-over prokázal nepatrnou kontaminaci mezi vzorky.
• Komparativní srovnání s manuálním předzpracováním ukázalo vynikající shodu kvantitativních výsledků (R2 ≥ 0,95, průměrná odchylka ~100 %).

Přínosy a praktické využití metody

Automatizované předzpracování minimalizuje manuální zásahy, zvyšuje reprodukovatelnost a propustnost analýz.
Metoda je vhodná pro klinické laboratoře, terapeutické monitorování léčiv, farmakokinetické studie a QA/QC v průmyslové analytice.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření platformy na další skupiny léčiv a metabolitů.
• Integrace s LIMS a on-line monitorovacími systémy pro rychlé rozhodování v klinické praxi.
• Využití vysokorozlišovací MS, miniaturizace procesů a AI-řízená optimalizace metodik.

Závěr

Plně automatizovaný workflow s CLAM-2000 a LC/MS/MS přináší rychlou, spolehlivou a vysoce reprodukovatelnou simultánní analýzu antiarytmik a jejich metabolitů v lidské plazmě.
Tento přístup snižuje časovou náročnost, minimalizuje riziko chyb a otevírá cestu k širší automatizaci klinických a farmaceutických analýz.

Reference

• Guidance for Industry: Bioanalytical Method Validation, US FDA, 2001.
• Guideline on Bioanalytical Method Validation in Pharmaceutical Development, Japan MHLW, 2013.