MassHunter MRM/dMRM/tMRM Database - Familiarization Guide

Význam tématu

Metody MRM, dMRM a tMRM jsou nezbytné pro vysoce selektivní a citlivou analýzu cílených sloučenin, například pesticidů v potravinách a životním prostředí. Dynamické a spouštěné režimy umožňují optimalizovat akviziční cykly a zaostřit potvrzovací fragmenty v okamžiku maximální intenzity chromatografického píku, což zvyšuje spolehlivost kvantifikace i kvalitativní identifikace.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem průvodce je ukázat krok za krokem, jak využít databázi MassHunter MRM/dMRM/tMRM k tvorbě metod pro akvizici dat na triple quadrupole LC/MS systémech (Ultivo, 6470B, 6495C). Ukázkový Checkout Mix obsahuje standardy pesticidů, pomocí kterých je demonstrováno vytvoření základní MRM metody, její rozšíření na dMRM a nakonec na tMRM metodu s potvrzovacími přechody.

Použitá metodika a instrumentace

Postup zahrnuje tyto kroky: import přechodů z databáze, nastavení chromatografie, běžné a dynamické plánování dat, určení retenčních časů z kvantitativní analýzy a vložení spouštěcích parametrů (Threshold, Entrance Delay, Trigger Delay, Window, Repeats).

Instrumentace:

• Hmotnostní spektrometry Agilent Ultivo LC/TQ, 6470B a 6495C
• Agilent 1200/1260/1290 Infinity LC systémy
• Softwarové balíky MassHunter Data Acquisition 10.x+, Qualitative Analysis 10.x+, Quantitative Analysis 10.2+
• Kolona ZORBAX Eclipse Plus C18, 2.1×100 mm, 1.8 µm
• Soli mobilní fáze: 5 mM octan kyseliny octové ve vodě a acetonitril

Hlavní výsledky a diskuse

Akviziční metody vytvořené z databáze umožnily zachytit primární i sekundární fragmenty ve správných retenčních oknech. dMRM režim snížil počet současně akvírovaných přechodů a tím zvýšil doby zotavení signálu (dwell time). tMRM metoda přidala potvrzovací přechody aktivované v okamžiku největšího signálu, což významně zvýšilo jistotu identifikace slabých analyz.

Přínosy a praktické využití metody

Popisovaný postup zkracuje vývoj metod pro rozsáhlé sady analytů (desítky až stovky látek), automatizuje výpočet retenčních časů a oken, optimalizuje akviziční cyklus a potvrzování fragmentů. To je klíčové pro rutinní kontrolu reziduí pesticidů v potravinách a environmentální monitorování.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj směřuje k plně automatizovanému ladění metod s adaptivním řízením cyklu v reálném čase, využití strojového učení pro predikci parametrů rozdělení času, implementaci vyšších rozlišení v HRMS a integraci do cloudových platforem pro rychlé vyhodnocení a sdílení dat.

Závěr

Databáze MassHunter MRM/dMRM/tMRM a navazující softwarové nástroje představují robustní a flexibilní platformu pro vývoj akvizičních metod na triple quadrupole systémech. Workflow od základního MRM, přes dynamické plánování až po spouštěné režimy umožňuje maximalizovat kvalitu dat a zároveň zrychlit implementaci v laboratorním provozu.

Reference

• Agilent Technologies. MassHunter MRM/dMRM/tMRM Database Familiarization Guide. 2020