A Comparison of PREMIER Columns with MaxPeak HPS Technology versus PEEK-lined Column Hardware

Význam tématu

Adsorpce aniontových nebo elektronově bohatých analyzátů na kovové povrchy typicky vede k poklesu signálu a deformaci chromatografických píku. Tato problematika omezuje přesnost a citlivost kvalitativních i kvantitativních analýz v kapalné chromatografii. Přechod na inertní povrchy slouží k minimalizaci ztrát způsobených nežádoucími interakcemi analytu s kovem.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo porovnat vlastnosti kolonek PREMIER s technologií MaxPeak HPS a tradičních nerezových kolonek s vnitřním PEEK potahem od dvou výrobců. Hlavními parametry byly účinnost separace, tvar píku, zpětný tlak a reprodukovatelnost mezi kolonkami.

Použitá instrumentace

Analýzy probíhaly na UPLC systému ACQUITY s vestavěným Fixed Loop Sample Managerem a detekcí UV při 254 nm. Kolonky o rozměrech 2,1×50 mm byly naplněny stacionární fází BEH C18 (2,5 µm). K řízení a zpracování dat bylo použito softwarové řešení Empower Chromatography Data System.

Hlavní výsledky a diskuse

Porovnání ukázalo, že kolony MaxPeak HPS vykazují o 20–25 % vyšší počet teorií než PEEK-potahované sloupce. Navíc generují až o 25 % nižší zpětný tlak a dosahují lepší symetrie píků. Při hodnocení pěti náhodně připravených kolonek každého typu se u MaxPeak HPS prokázala výrazně nižší variabilita retenčních časů. Analýza vztahu objemu kolonek k retenčnímu času Vo naznačila, že PEEK-potahované sloupce trpí nerovnoměrnou vnitřní stěnou, což u MaxPeak HPS chybí díky přesnější kovové konstrukci.

Přínosy a praktické využití metody

Technologie MaxPeak HPS poskytuje:

• vynikající obnovu aniontových a elektronově bohatých látek,
• vyšší chromatografickou účinnost,
• lepší tvar píku a nižší tlak,
• vysokou reprodukovatelnost mezi jednotkami.

Tyto vlastnosti jsou klíčové zejména v bioanalytice, farmaceutickém vývoji a QA/QC laboratořích.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k rozšíření organicko-anorganických povlaků na různé typy stacionárních fází a kolonek. Hybridní povrchy lze aplikovat na techniky RPLC-MS, iontovou chromatografii či mikrofluoridaci biologických vzorků. Výhledová integrace s automatizovanými systémy a multidimenzionálními separacemi přinese další zvýšení citlivosti a robustnosti metod.

Závěr

Sloupce PREMIER s technologií MaxPeak HPS překonávají PEEK-potahované nerezové kolony v účinnosti, reprodukovatelnosti a tvaru píku. Nabízejí spolehlivé řešení pro analýzu kovově citlivých analytů bez omezení pevnostních a rozměrových vlastností PEEK materiálů.

Reference

1. Lauber M. et al. Low Adsorption HPLC Columns Based on MaxPeak High Performance Surfaces. Waters White Paper 720006930EN, 2020.
2. Gjerde D. T.; Hanna C. P.; Hoang L.; Hornby D. DNA Chromatography. Wiley-VCH Verlag GmbH & Co., 2002.
3. Lough J.; Mills M. J.; Maltas J. Analyte Adsorption in Liquid Chromatography Valve Injectors for Samples in Non-eluting Solvents. J. Chromatogr. A, 1996, 726, 67–75.
4. DeLoffi M.; Nguyen J. M.; Izzo G. Improved Chromatographic Performance with a PREMIER Peptide C18 Column Versus a Titanium-Lined C18 Column Technology. Waters Application Note 720007022, 2020.
5. Birdsall R. et al. Increasing Chromatographic Performance of Acidic Peptides in RPLC-MS-based Assays with ACQUITY PREMIER Featuring MaxPeak HPS Technology. Waters Application Note 720007003, 2020.