High Speed, High Resolution Analysis (Part 15) Analysis of Ginsenosides in Ginseng

Význam tématu

Analýza ginsenosidů v rostlinných extraktech má klíčový význam pro kontrolu kvality, standardizaci a ověřování účinnosti produktů obsahujících ženšen. Tyto triterpenické saponiny jsou zodpovědné za adaptogenní vlastnosti rostliny, s pozitivním dopadem na odolnost vůči stresu a podporu kognitivních funkcí.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo vyvinout rychlou a vysoce rozlišovací metodu pro stanovení pěti hlavních ginsenosidů (Rg1, Re, Rb1, Rc, Rd) v referenčních roztocích a v práškovém extraktu ženšenu. Studie ukazuje využití ultra fast LC systému Prominence UFLC společně s kolonkou Phenomenex Synergi Polar-RP (2,5 µm) a popisuje optimalizaci separačních podmínek i přípravu vzorku.

Použitá metodika a instrumentace

• Chromatografický systém: Prominence UFLC (Shimadzu)
• Kolonka: Phenomenex Synergi Polar-RP 100 Å, 50 × 2,0 mm, 2,5 µm
• Mobilní fáze: gradient vody (A) a acetonitrilu (B), od 15 % B po 30 % B během 8 min
• Průtok: 0,6 mL/min, teplota 35 °C
• Detekce: UV detektor SPD-20A při 203 nm
• Příprava vzorku (práškový extrakt): extrakce 60% metanolem, ultrazvuk, centrifugace, sloupcová extrakce (SPE) na kartridži strata-X

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila úplné rozlišení pěti ginsenosidů do 8 min, přičemž základní separace Rg1 a Re byla dosažena během prvních 4 min. Chromatogram referenční směsi (50 mg/L) ukázal ostré symetrické píky bez podpíků z okolních kontaminantů. Analýza práškového extraktu ženšenu prokázala, že bez SPE je pozorována četná vysokopolární interferující látky. Po SPE krok vyčištění výrazně redukuje přítomnost těchto interferencí a zlepšuje opakovatelnost stanovení.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká propustnost (analýza <10 min) vhodná pro rutinní kontrolu kvality
• Kompaktní robustní sestava pro QC laboratoře i výzkumná pracoviště
• Metoda lze snadno adaptovat pro jiné rostlinné extrakty se podobnými triterpenickými saponiny

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace s hmotnostní spektrometrií pro identifikaci minoritních ginsenosidů
• Další miniaturizace kolonek a využití vyššího tlaku pro ultra-UHPLC
• Vyhodnocení metod ve spojení s profi lingem metabolit pro komplexní charakterizaci rostlinných extraktů
• Implementace on-line SPE a automatizace přípravy vzorků pro zvýšení reproducibility

Závěr

Vyvinutá metoda UHPLC s vysokým rozlišením a rychlým gradientem poskytuje spolehlivou, reprodukovatelnou a efektivní analýzu klíčových ginsenosidů z ženšenu. Začlenění SPE kroku výrazně zlepšuje čistotu vzorků a kvalitu chromatografických dat, což je zásadní pro rutinní kontrolu kvality a další farmakologické studie.

Reference

• The 15th Revision of the Japanese Pharmacopeia (Society of Japanese Pharmacopeia)