Analysis of N-nitroso-fenfluramine using LC-MS

Význam tématu

Analýza N-nitroso-fenfluraminu je klíčová pro bezpečnost potravinových doplňků a farmaceutických přípravků, neboť N-nitrososloučeniny mohou být karcinogenní. Spolehlivá a citlivá detekční metoda umožňuje včasné odhalení kontaminace.

Cíle a přehled studie / článku

Studie prezentuje provizorní metodu pro stanovení fenfluraminu a jeho N-nitroso derivátu v extraktu z kapsle dietního doplňku. Cílem bylo demonstrovat separaci, identifikaci a kvantifikaci pomocí LC-MS s elektrospray ionizací v pozitivním módu.

Použitá metodika a instrumentace

Pro extrakci bylo použito 50 mg prášku z kapsle, extrahovaných 5 mL metanolu. Analýza probíhala na systému LCMS-2010A (Shimadzu) v ESI-pozitivním módu. Klíčové parametry:

• Kolona: Phenomenex LUNA 5 µ C18(2) (2,0 mm × 150 mm)
• Mobilní fáze A: 0,1 % TFA ve vodě, B: 0,1 % TFA v acetonitrilu
• Gradient: 30 % B (0 min) → 80 % B (15 min) → 80 % B (20 min)
• Průtok 0,2 mL/min, teplota kolony 30 °C, objem injekce 2 µL
• ESI sondy: napětí +4,5 kV, teplota CDL 250 °C, block heater 200 °C
• Plynné podmínky: nebulizace 1,5 L/min, sušící plyn 0,2 MPa
• Scan režim m/z 100–400 (1,0 s/scan), SIM pro m/z 232,3 (fenfluramin)

Hlavní výsledky a diskuse

Celkový iontový chromatogram odhalil fenfluramin s retencí 6 min a N-nitroso-fenfluramin se dvěma izomerními vrcholy mezi 16,5–17,5 min. Pro fenfluramin byl detekován MH+ m/z 232, pro N-nitroso-derivát MH+ m/z 261 a adukt [M+H+CH3CN]+ m/z 302. Metoda umožnila citlivost až 1 ng/mL a lineární kalibraci v rozsahu 1–100 ng/mL s korelačním koeficientem >0,999.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda nabízí:

• Vysokou citlivost pro sledování kontaminace toxicitních nitrososloučenin
• Rychlý a reproducibilní průběh analýzy s nízkým objemem mobile fáze
• Možnost aplikace v rutinním QA/QC v potravinářství a farmaceutickém výzkumu

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vylepšení mohou spočívat ve validaci extrakčního výtěžku a recovery, rozšíření o další N-nitrososloučeniny, automati­zaci přípravy vzorku a integraci s vysokorozlišovacím MS pro přesnou identifikaci struktur.

Závěr

Návrh metody LC-ESI-MS pro stanovení fenfluraminu a jeho N-nitroso derivátu prokázal vysokou selektivitu, citlivost a linearitu. Může být využit jako spolehlivý screeningový nástroj v průmyslových i akademických laboratořích.

Reference

1. Shimadzu Corporation. LC-MS Application Data Sheet No. 51: Analysis of N-nitroso-fenfluramine using LC-MS.