Improved Aromatic Acids Analysis: Saving Significant Time, Solvent, Sample and Money with 1.9 μm Agilent InfinityLab Poroshell 120 Columns

Význam tématu

Analýza aromatických kyselin je klíčová v zemědělství, potravinářském průmyslu a malomolekulární farmaceutické analýze. Rychlé a efektivní stanovení těchto látek umožňuje úsporu času, rozpouštědla a vzorku, což vede ke snížení nákladů a zvýšení produktivity laboratorních procesů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo porovnat výkon čtyř chromatografických sloupců: tradičního 5 µm ZORBAX Eclipse Plus C18 (4,6×250 mm) a tří superficially porous Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (1,9, 2,7 a 4 µm, 2,1×50 mm). Analýza šesti aromatických kyselin probíhala v gradientu formiové kyseliny a acetonitrilu bez potřeby další úpravy metody.

Použitá metodika a instrumentace

Pro experiment bylo použito LC přístrojové vybavení Agilent 1290 Infinity, sestávající z:

• Binary Pump G4220A se solventním mixérem Jet Weaver
• High Performance Autosampler G4226A s ultranízkou disperzí
• Thermostatted Column Compartment G1316C
• Diode Array Detector G4212A s Max-Light cartridgí

Použité chromatografické kolony:

• ZORBAX Eclipse Plus C18, 4,6×250 mm, 5 µm
• InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2,1×50 mm, 1,9 µm
• InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2,1×50 mm, 2,7 µm
• InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2,1×50 mm, 4 µm

Mobilní fáze byla složena z 0,2 % formiové kyseliny ve vodě (A) a acetonitrilu (B). Metody byly geometricky škálovány podle objemu sloupce.

Hlavní výsledky a diskuse

Sloupec 1,9 µm dosáhl minimálního rozlišení 2,9 za 3 minuty, což je 12× rychlejší než původní analýza na 5 µm kolóně, přičemž spotřeba mobilní fáze klesla o 96 % a množství vzorku o 75 %. Ultrafast metoda na 1,9 µm sloupci umožnila separaci za 0,35 minuty (min. rozlišení 2,3) při tlaku až 1150 bar, což představuje 103× zrychlení a 98 % úsporu rozpouštědla. Kolony s většími částicemi (2,7 a 4 µm) generovaly nižší tlak (281 a 141 bar) za cenu snížení rozlišení (2,1 a 1,8) a kapacity (52 a 43).

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení doby analýzy
• Redukce spotřeby mobilní fáze a vzorku
• Možnost snadného přenosu metody mezi sloupci
• Optimalizace pro vysokoprůchodové laboratorní provozy

Budoucí trendy a možnosti využití

Další miniaturizace chromatografických systémů, integrace s hmotnostní spektrometrií pro zvýšení citlivosti, využití ve vysokoprůchodových screeninzích a rozvoj „zelené“ analytické chemie s minimální spotřebou organických rozpouštědel.

Závěr

Superficially porous Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 kolony, zejména ve formě 1,9 µm, představují efektivní nástroj pro moderní chromatografii aromatických kyselin. Nabízejí snadný přenos metod z tradičních kolon, významné časové a nákladové úspory a možnost ultrarychlého rozlišení při vhodné přístrojové konfiguraci.

Reference

1. Gratzfield-Hugsen A.; Naegele E. Maximizing efficiency using Agilent Poroshell 120 Columns. Agilent Technologies Application Note, 5990-5602EN, 2016.
2. Meyer V. R. Practical High Performance Liquid Chromatography. 4th ed., Wiley, 2004.
3. Transfer of Methods between Poroshell 120 EC-C18 and ZORBAX Eclipse Plus C18 Columns. Agilent Technologies Application Note, 5990-6588EN, 2011.