Automated Solid Phase Extraction (SPE) Method Development using Oasis Mixed Mode Sorbent Selection Plate

Význam tématu

Analýza složitých biologických vzorků pomocí LC–MS vyžaduje efektivní odstranění rušivých matricových komponent, které mohou zkreslit kvantifikaci cílových analytů. Mixed-mode SPE je ověřenou technikou pro čistění vzorků, avšak vývoj optimálních protokolů je časově náročný a náchylný k chybám při manuálních krocích.

Cíle a přehled studie

Cílem této studie je demonstrovat automatizaci metody vývoje mixed-mode SPE pomocí sorbent selection plate Oasis 2×4 a pipetovacího robota Andrew+. V rámci studie byly analyzovány čtyři analytické látky v osmi replikách lidské krevní plazmy.

Použitá metodika a instrumentace

Popis protokolu Oasis 2×4 metodického vývoje:

• Využití dvou optimalizovaných protokolů pro stanovení podmínek pro naložení, promytí a eluční fázi.
• Automatizace kroků pipetování a přenosu kapalin pomocí Andrew+ robota s ovládáním v softwaru OneLab.
• Laboratorní sestava zahrnovala: 10–300 µl a 100–5000 µl jednopryžové pipety, 5–120 µl a 50–1200 µl osmi-kanálové pipety, vakuový manifold pro SPE, deepwell mikroplačku, mikrozkumavky, pipetové nádoby a stojan na špičky.

Kvantifikace analytů proběhla na Waters ACQUITY UPLC I-Class spojeném s Xevo TQ-S MS v režimu MRM (pozitivní i negativní ionizace).

Hlavní výsledky a diskuse

Automatizované provedení metody zkrátilo dobu vývoje z více než čtyř hodin při manuálním zpracování na méně než jednu hodinu. Výběr optimálního sorbentu a stanovení podmínek vedlo k vysoké reprodukovatelnosti a konzistentní návratnosti analytů napříč vzorky.

Přínosy a praktické využití metody

• Výrazné zkrácení času potřebného pro vývoj SPE metod.
• Minimální potřeba manuálních zásahů – pouze výměna kolektorové destičky mezi kroky.
• Vysoká reprodukovatelnost díky přesnému pipetování a řízení protokolu.
• Využití dostupného laboratorního vybavení zajišťuje snadnou implementaci.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Integrace umělé inteligence pro automatické navrhování protokolů SPE.
• Rozšíření sorbentových platforem pro různé typy analytů a matic.
• Vyšší propustnost a paralelní zpracování mnoha vzorků v rámci farmaceutického a klinického výzkumu.
• Možnosti plné robotické automatizace v rámci laboratoří s nepřetržitým provozem.

Závěr

Automatizace vývoje mixed-mode SPE pomocí Oasis 2×4 sorbent selection plate a pipetovacího robota Andrew+ přináší rychlé, reprodukovatelné a časově úsporné řešení pro přípravu vzorků v LC–MS analýzách. Metoda šetří 2 až 3 hodiny manuální práce a zvyšuje konzistenci výsledků.

Reference

• Blaze M., Brennan K. Automated Solid Phase Extraction Method Development using Oasis Mixed Mode Sorbent Selection Plate. Waters Corporation, Milford, MA, USA.