Measurement of Amino Acids and Acylcarnitines in Dried Bloodspots by Flow-Injection Analysis/Tandem Mass Spectrometry (FIA-MS/MS) for Clinical Research Use

Význam tématu

Analýza aminokyselin a acylkarnitinů v suchých krevních kapkách zaznamenala v klinickém výzkumu značný rozvoj díky minimálním nárokům na vzorek a snadné přepravě.
Vysoká propustnost a rychlá doba odezvy jsou klíčové pro sledování biomarkerů při klinických studiích a farmaceutickém vývoji.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem bylo ukázat rychlou a přesnou kvantifikaci 13 aminokyselin a 31 acylkarnitinů extrahovaných ze suchých krevních kapek za využití metody flow‐injection analysis s tandemovou hmotnostní spektrometrií (FIA‐MS/MS).
Autoři demonstrují efektivní využití pracovní doby a minimální spotřebu rozpouštědel při vysoké přesnosti měření.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorky připravené z komerčního neodivativního kitu ClinSpot® byly extrahovány do sběrných destiček centrifugální filtrací.
Metoda FIA‐MS/MS probíhala na zařízení Waters ACQUITY UPLC/Xevo TQD IVD řízeném softwarem MassLynx 4.2 s NeoLynx 4.2 Application Manager.
Využitý režim variabilního průtoku optimalizoval citlivost a preciznost detekce.
Data byla shromážděna pro 70 monitorovaných MRM přechodů a zpracována automaticky v NeoLynx.

Hlavní výsledky a diskuse

Mezi‐šaržová imprecise byla nižší než 15 % CV pro všechny měřené sloučeniny nad LOD.
Injekční cyklus 1,8 min umožnil analýzu 192 vzorků za méně než 6 hodin s použitím méně než 200 ml rozpouštědel.
Automatizované nástroje NeoLynx zrychlily technickou kontrolu výsledků díky funkci Auto Review a šifrování datových souborů zvýšilo bezpečnost a integritu dat.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlost a spolehlivost FIA‐MS/MS na uvedeném systému dovolují nasazení v laboratořích s vysokou propustností vzorků.
Minimální spotřeba rozpouštědel a zautomatizované zpracování dat snižují provozní náklady a riziko lidské chyby.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření metody o další metabolity a indikátory onemocnění v suchých krevních kapkách.
• Integrace s plně automatizovanými přípravnými stanicemi pro další zvýšení propustnosti.
• Využití umělé inteligence pro pokročilou analýzu a prediktivní modelování metabolomických dat.
• Miniaturizace a přenosné hmotnostní spektrometry pro terénní diagnostiku.

Závěr

Popsaná metoda FIA‐MS/MS na systému Waters ACQUITY UPLC/Xevo TQD IVD nabízí rychlou, přesnou a zabezpečenou analýzu aminokyselin a acylkarnitinů ve vzorcích suchých krevních kapek.
Přináší výrazné zlepšení propustnosti, škálovatelnosti a ekonomiky provozu v klinickém výzkumu.

Reference

• Brown HA. Measurement of Amino Acids and Acylcarnitines in Dried Bloodspots by Flow‐Injection Analysis/Tandem Mass Spectrometry (FIA‐MS/MS) for Clinical Research Use. Waters Corporation; 2017.