Characterization of products formed by forced degradation of Amlodipine Besylate using LC/MS/MS

Význam tématu

Studium nuceného rozkladu léčivých látek slouží k identifikaci potenciálních degradačních produktů, které mohou ovlivnit bezpečnost, účinnost a trvanlivost lékové formy. Včasná charakterizace těchto produktů pomáhá optimalizovat formulaci, výrobní postupy a stanovit adekvátní podmínky skladování v souladu s doporučeními ICH a FDA.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem práce bylo podrobit Amlodipin benzensulfonátu stresovým podmínkám (kyselá, zásaditá, oxidační a termální degradace), analyzovat vzniklé produkty pomocí vysoce citlivé LC/MS/MS a stanovit mechanismy jejich tvorby. Studie využila triple kvadrupólový hmotnostní spektrometr Shimadzu LCMS-8080 a UV detekci pro kvantitativní i kvalitativní sledování degradace.

Použitá metodika a instrumentace

Pro nucenou degradaci byly připraveny následující vzorky:

• Kyselá hydrolýza: 5 M HCl, 6 hodin při 80 °C – ~60% degradace.
• Zásaditá hydrolýza: 1 M NaOH, 2 hodiny při 80 °C – ~25% degradace.
• Oxidace: 30% H₂O₂, 6 hodin při 80 °C – ~20% degradace.
• Termální degradace: 80 °C, 48 hodin – ~0,25% degradace.

Metoda analýzy:

• Soustava Shimadzu LCMS-8080 se zdrojem ESI.
• Kolonka Shim-pack XR ODS (75×3 mm, 2,2 μm), T = 40 °C, průtok 0,5 mL/min.
• Mobilní fáze A: 10 mM acetát amonný s 0,4 % amoniaku, pH 7,0; B: acetonitril; gradient 40–100 % B.
• Detekce: UV 238 nm, ESI/MS, HSID, dusík jako neslazený a nosný plyn.
• Objem injekce: 5 μL.

Hlavní výsledky a diskuse

Analýza ukázala vznik hlavních degradačních produktů ve všech typech stresu. V kyselém a oxidačním prostředí se objevily ionty m/z 407 a 351, v zásaditém m/z 395, 349 a 381. Společné fragmenty o m/z 180 a 167 naznačují zachování dihydropyridinového jádra. Oxidativní podmínky selektivně vytvářely impuritu definovanou v Evropské farmakopeji jako Imp D (m/z 407). Termální degradace byla minimální.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlá LC/MS/MS metodika umožnila simultánní detekci a identifikaci nízkokoncentrovaných degradantů bez nutnosti izolace. Výsledky poskytují hodnotné informace pro vývoj stabilních formulací, stanovení vhodných podmínek skladování a přípravu regulačních dokumentací.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k aplikaci vysokorozlišovacího hmotnostního spektrometru pro přesnější určení struktur a k integraci automatizovaných in silico predikcí rozkladových drah. Kombinace nástrojů LC/MS/MS s pokročilými výpočetními přístupy umožní rychlejší návrh stabilních léčiv a predikci nežádoucích produktů.

Závěr

Studie potvrdila vysokou efektivitu LCMS-8080 pro charakterizaci nucených rozkladových produktů Amlodipinu benzensulfonátu. Různé stresové podmínky vedly k odlišnému spektru degradantů, přičemž nejintenzivnější rozklad byl v kyselém prostředí. Metoda přináší rychlý a spolehlivý postup pro stabilitní testování v rané fázi vývoje léků.

Reference

1. Abela D., Schembri O., Farrugia C. Chromatographic Determination of the Stability of Solutions of Amlodipine Benazepril and Amlodipine Besilate. Seventh World Meeting on Pharmaceutics, Biopharmaceutics and Pharmaceutical Technology, Malta, 2010.
2. Aneesh TP, Rajasekaran A. Forced degradation studies – A tool for determination of stability in pharmaceutical dosage form. Int. J. Biological & Pharmaceutical Research, 3(5): 699–702, 2012.
3. Patil KR, Rane VP, Sangshetti JN, Yeole RD, Shinde DB. Stability indicating LC method for simultaneous determination of Amlodipine and Olmesartan in dosage form. J. Chromatogr. Sci., 2010.
4. ICH Q1A(R2) – Stability Testing of New Drug Substances and Products, Nov. 2003.