SKUPINOVO-SELEKTÍVNY POLYMÉR S ODTLAČKOM MOLEKULY AKO SORBENT PRE EXTRAKCIU KUMARÍNOV Z LIEČIVÝCH RASTLÍN

Význam tématu

Coumariny jsou významné přírodní látky s širokým spektrem biologických účinků. Vzhledem k jejich výskytu v léčivých rostlinách a potenciálním interferencím při analýze komplexních vzorků je klíčové využít vysoce selektivní čistící postupy. Molekulárně otiskované polymery představují perspektivní sorbenty schopné selektivně zachycovat cílové sloučeniny před chromatografickou analýzou.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem studie bylo syntetizovat polymer s molekulovým otiskem umbeliferonu a ověřit jeho schopnost extrahovat různé deriváty kumarínu z extraktů léčivých rostlin. Studie se zaměřila na vliv struktury analytů, optimalizaci SPE podmínek a následnou kvantitativní analýzu pomocí HPLC.

Použitá metodika a instrumentace

Syntéza MIP proběhla nekovalentní polymerizací kyseliny metakrylové a EGDMA v přítomnosti umbeliferonu jako templátu za použití AIBN jako iniciátoru a chloroformu jako porogenu. Po polymerizaci a mletí byl templát odstraněn Soxhletovou extrakcí metanol/kyselina octová. SPE protokol zahrnoval aktivaci sorbentu, aplikaci filtrátu rostlinného macerátu, promytí vodou a eluci metanol/kyselina octová (9/1). HPLC separace byla provedena gradientní elucí na RP18 kolóně s detekcí v UV oblasti.

Použitá instrumentace

• HPLC systém Agilent Technologies 1200
• Dávkovací ventil Rheodyne, objem vpichu 20 µl
• Detektor s diódovým polem (DAD)
• Kolona LiChrospher 100 RP18, 250×4 mm, 5 µm
• Laboratorní míchačka, vakuové odsávání, Soxhletova extrakční aparatura

Hlavní výsledky a diskuse

Polymer vykazoval sorpční kapacitu pro umbeliferon 401 µg/100 mg, zatímco kontrolní NIP dosáhl 132 µg/100 mg. Nejvyšší specifická kapacita byla pozorována u herniarinu (120 µg/100 mg). Rozpouštědlo mělo významný vliv na sorpci – nejúčinnější byla směs metanol/voda (1/1). Doporučená SPE procedura poskytla výtěžnost kumarínů nad 73 % v koncentracích 0,5–5,0 µg/ml s RSD < 10 %. V reálných vzorcích levandule a archangeliky byly úspěšně identifikovány kumarin a umbeliferon v řádu jednotek µg/g.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoce selektivní izolace kumarínů z komplexních rostlinných extraktů
• Snížení interferencí a ochrana HPLC kolony
• Možnost aplikace na další skupiny strukturálně příbuzných látek

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj směřuje k automatizaci on-line MIP-SPE-HPLC systémů, rozšíření spektra templátů pro nové třídy látek a úpravám polymerů pro zvýšení kapacity a selektivity. Perspektivní je také kombinace s detekcí hmotnostní spektrometrií pro rozsáhlejší metabolitické studie.

Závěr

Syntetizovaný MIP sorbent pro umbeliferon prokázal vysokou sorpční kapacitu a skupinovou selektivitu pro řadu kumarínů. Navržená off-line SPE-HPLC metoda je vhodná pro analýzu kumarínů v léčivých rostlinách a nabízí perspektivu rozšíření na další analytické aplikace.

Reference

1. Scotter M.J., Roberts D.P.T., Rees G.O. Analytical Methods 3, 414 (2011)
2. Zacaroni L.M., Cardoso M.G., Saczka A.A., Moraes A.R., Pereira A.J., Resende-Machado A.M., Nelson D.L. Analytical Letters 44, 2061 (2011)
3. Waksmundzka-Hajnos M., Sherma J., Kowalska T. Thin Layer Chromatography in Phytochemistry, CRC Press, Boca Raton 2008
4. Zgórka G., Głowniak K. Phytochemical Analysis 10, 268 (1999)
5. Sádecká J., Polonský J. Chemické Listy 99, 222 (2005)
6. Bisset N.G., Wichtl M. Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals, Medpharm Scientific Publishers, Stuttgart 2001
7. Hoult J.R.S., Paya M. General Pharmacology 27, 713 (1996)
8. Esteban A.M. Fresenius Journal of Analytical Chemistry 370, 795 (2001)