Shim-pack - Scepter Diol-HILIC Series - INSTRUCTION MANUAL

Význam tématu

HILIC metoda nabízí účinné oddělení polárních sloučenin, které jsou obtížně separovatelné reverzní fází. Použití diolových kolon Shim-pack Scepter umožňuje zvýšenou citlivost, reprodukovatelnost a dlouhou životnost kolony, což je klíčové v bioanalytice, farmaceutickém výzkumu a QA/QC.

Cíle a přehled studie / článku

Tento manuál popisuje správnou instalaci, provoz a údržbu Shim-pack Scepter Diol-HILIC kolon pro HPLC/UHPLC. Cílem je zajistit optimální výkon, minimalizovat mrtvý objem a prodloužit životnost kolon.

Použitá metodika a instrumentace

• Kolony Shim-pack Scepter Diol-HILIC (částice 1,9 μm, 3 μm, 5 μm; průměr 2,0–4,6 mm)
• HPLC/UHPLC systém s maximálním tlakem 60–130 MPa
• PEEK nebo nerezové UVHPLC tubing (vnitřní průměr 0,1–0,3 mm)
• UHPLC fittingy: PEEK male nuty, ferrule, Nexlock, Ghost Trap DS
• Předkolony (guard column), membránové filtry (0,45 μm), stříkačkové filtry
• Automatický vzorkovač s rychlým přepínáním ventilů, degaser eluentu

Hlavní výsledky a diskuse

Kvalita kolony je ověřována QC testy zahrnující chromatografické parametry uvedené v Column Performance Report. Doporučené podmínky: tlak do 100 MPa pro 1,9 μm částice a do 45 MPa pro 3 μm a 5 μm, pH rozsah 2–10, teplota 20–40 °C (max. 50 °C). Klíčové je použití co nejkratších spojek pro redukci mrtvého objemu a správné odvzdušnění eluentu ke stabilní detekci.

Přínosy a praktické využití metody

• Vyšší rozlišení polárních látek oproti reverzní chromatografii
• Vynikající reprodukovatelnost retence a špičkové účinnosti
• Zkrácené doby analýzy díky provozu pod vysokým tlakem
• Prodlužení životnosti kolony díky správné filtraci a pravidelné údržbě

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další miniaturizace HILIC kolon pro mikro a nano UHPLC, integrace s hmotnostní spektrometrií a vývoj nových stacionárních fází pro separaci peptidů, oligonukleotidů a složitých glykomik.

Závěr

Dodržování doporučených podmínek instalace, provozu a údržby Shim-pack Scepter Diol-HILIC kolon je zásadní pro stabilní, reprodukovatelné výsledky. Správný výběr mobilní fáze, optimální tlak a kvalitní předfiltrace vzorku minimalizují riziko poškození a maximalizují životnost kolony.

Reference

Žádné literární odkazy neuvedeny