High Speed Analysis of Cyanocobalamin in compliance with Chapter 621 of USP40

Význam tématu

Rychlá a spolehlivá analýza cyanocobalaminu (vitaminu B12) dle monografie USP kapitoly 621 je v praxi klíčová pro kontrolu kvality farmaceutických přípravků. Zkrácení doby analýzy a snížení spotřeby rozpouštědel přispívá ke zvýšení produktivity laboratoří a úspoře provozních nákladů.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo přenést a optimalizovat USP monografickou metodu pro analýzu cyanocobalaminu na moderní chromatografický systém. Prověřila se možnost zkrácení doby běhu analýzy při zachování požadavků na system suitability podle USP 621.

Použitá metodika a instrumentace

• HPLC systém: Shimadzu Prominence-i LC-2030C Plus
• Kolony: Shim-pack VP-ODS (4,6×150 mm, 5 µm) a Shim-pack Velox C18 (4,6×100 mm, 2,7 µm)
• Mobilní fáze: voda/methanol 13:7 (v/v), izokratické podmínky
• Průtoky: 0,50 mL/min (rychlá metoda), 0,93 mL/min (optimalizovaná)
• Teplota kolony: 25 °C; detekce UV při 361 nm
• Objem injekce: 100 µL (původní metoda), 67 µL (upravené metody)
• Spotřební materiál: hnědé vialy 1,5 mL, PTFE/silikonové septa, PEEK šroubení, nylonové filtry 0,45 µm

Hlavní výsledky a diskuse

• Retenční časy cyanocobalaminu: 5,163 min (původní metoda), 2,368 min (0,50 mL/min), 1,297 min (0,93 mL/min)
• Teoretické platiny: nárůst o 81 % při 0,50 mL/min (nad limitem USP), o 23 % při 0,93 mL/min (v mezích USP-621)
• System suitability: RSD ploch < 2 %, hodnoty tailing faktoru v souladu s monografií
• Zkrácení doby analýzy až o 75 % a výrazné snížení spotřeby rozpouštědel

Přínosy a praktické využití metody

Optimalizovaná metoda umožňuje vyšší průchodnost vzorků, nižší náklady na rozpouštědla a zachování kvality výsledků. Je vhodná pro rutinní QA/QC laboratoře ve farmaceutickém průmyslu.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Nasazení ultra-high-performance kapalinové chromatografie a částic nové generace
• Další miniaturizace kolony pro zvýšení rychlosti a snížení spotřeby
• Automatizace přípravy vzorků a integrace s laboratorními informačními systémy
• Rozšíření metody na analýzu dalších vitamínů a farmaceutických látek
• Uplatnění principů zelené chemie pro udržitelné analytické procesy

Závěr

Přenos a optimalizace USP-621 metody na Shim-pack Velox C18 kolonu a Prominence-i systém prokázaly významné zkrácení doby analýzy, úsporu rozpouštědel a plné splnění požadavků monografie.

Reference

• USP General Chapter 621, USP 40 – NF35, First Supplement
• USP Monograph, Cyanocobalamin, USP 40 – NF35, First Supplement
• Application News No. L464, Shimadzu