Simplify LC-MS Analysis of mAb Charge Variants - IonHance CX-MS pH Concentrates

Význam tématu

Charakterizace nabíjecích variant monoklonálních protilátek (mAb) je klíčová v biopharmaceutickém vývoji i kontrole kvality. Přesná separace a hmotnostní analýza těchto variant odhaluje drobné modifikace, které ovlivňují účinnost a bezpečnost léčiv.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem je představit IonHance CX-MS pH koncentráty A a B, speciálně navržené pro zjednodušení a zlepšení LC-MS analýzy intaktních mAb a jejich IdeS štěpných produktů. Studie se zaměřuje na minimalizaci aduktového šumu, potlačení iontového útlumu a dosažení reprodukovatelné separace nabíjecích variant.

Použitá metodika a instrumentace

Metodika kombinuje on-line iontovou výměnnou chromatografii (SCX) na BioResolve™ SCX mAb 3 µm kolonech s vysokým vymezením pH pomocí IonHance CX-MS koncentrátů, následnou detekci pomocí LC-MS. Koncentráty se připravují ředěním 10× pufrů vodou MS kvality, což zjednodušuje přípravu a snižuje kontaminaci.

Pokud není uvedeno žádná další sekce „Použitá instrumentace“

Hlavní výsledky a diskuse

Optimalizované pH a iontová síla z IonHance CX-MS koncentrátů významně omezí nežádoucí adukty a supercharging fenomén, což vede k čistším spektrogramům. U intaktních mAb byly jednotlivé nabíjecí varianty (kyselé, hlavní a bazické) jasně odděleny a hmotnostně identifikovány. Podobně byly zřetelně detekovány F(ab’)2 a (Fc/2)2 fragmenty po IdeS štěpení.

Přínosy a praktické využití metody

• Zvýšená čistota hmotnostních spekter a nižší chemický šum
• Rychlejší a reprodukovatelnější příprava mobilní fáze díky koncentrátům
• Rozšířená kompatibilita s existujícími BioResolve SCX mAb kolony
• Jednodušší optimalizace a standardizace analytických protokolů v QC laboratořích

Budoucí trendy a možnosti využití

Očekává se další rozvoj pufrů se specifickými iontovými modifikátory pro různé třídy bílkovin. Integrace s automatizovanými pracovišti a pokročilá datová analýza pomocí strojového učení umožní rychlejší charakterizaci komplexních bioterapeutik.

Závěr

IonHance CX-MS pH koncentráty A a B představují efektivní řešení pro zlepšení citlivosti a reprodukovatelnosti LC-MS analýzy mAb nabíjecích variant. Jejich snadné použití a kompatibilita s BioResolve SCX mAb kolony zkracují analytický čas a zvyšují kvalitu dat.

Reference

Žádné literární odkazy nebyly v původním textu uvedeny.