Rychlé a efektivní čištění vzorků pro analýzu biomolekul (AdvanceBio Spin Columns)

Mnoho biomolekul, jako jsou monoklonální protilátky, se skladuje v pufru obsahujícím pomocné látky, konzervační látky a detergenty, které udržuji stabilitu vzorku. Tyto dodatečné složky mohou často narušovat následnou analýzu a také kontaminovat LC kolonu nebo samotný detektor.

Existuje řada postupů, jak některé z těchto nežádoucích látek odstranit. Centrifugace s použitím gelových filtračních kolonek je jedním z nejrychlejších a nejjednodušších způsobů, jak tyto složky odstranit. Tuto techniku lze také použít k jednoduchému přenosu analytů z jednoho pufrovacího roztoku do jiného, a to s minimální ztrátou vzorku nebo změnou jeho složení a koncentrace. Tento přístup je rychlý, pohodlný a velice snadný.

Altium: Rychlé a efektivní čištění vzorků pro analýzu biomolekul (AdvanceBio Spin Columns).

Kolonky AdvancedBio jsou určené pro účinnou úpravu vzorku před analýzou proteinů a oligonukleotidů ve vodném prostředí se zachováním jejich přirozené struktury a s vhodnou iontovou sílou a pH, které slouží převážné k odstranění solí a jiných nežádoucích malých molekul. Tyto centrifugační kolonky jsou založeny na principu gelové filtrace a jsou dostupné ve formátu jednotlivých kolonek a 96-jamkových mikrotitračních destiček, které slouží, jak pro analytické, tak pro semipreparativním účely.

Popis produktu

• 1980-1103 | AdvancedBio spin columns, < 100 ul | 25 ks
• 1980-1105 | AdvancedBio spin columns for desalting or buffer exchange, <1000 ul samples, + 4 re-usable adapters | 50 ks
• 41980-1104 | AdvancedBio spin columns for desalting or buffer exchange, 10-50 ul sample | 1 ks
• 1980-1106 | AdvancedBio spin column re-usable adapters, for optional use with kat.č.1980-1105 | 8 ks
• 5043-9312 | Agilent 96-well plate, 0,33 mL, round wells, V shape, polypropylene, 14 mm | 25 ks
• 5043-9308 | Agilent 96-well plate, 1,2 mL, round wells, U shape, polypropylene, 27 mm | 25 ks
• 5610-2049 | Centrifuge tube and cap, polypropylene, 50 mL | 25 ks
• 190065200 | Centrifuge tube polypropylene, graduated, 29 mm o.d., 115 mm, conical base, wide neck, threaded top | 500 ks
• 5043-9317 | Sealing mat, 96 wells, round, preslitted, silicone | 1 ks

Princip gelové filtrace

Gelová filtrace neboli vylučovací chromatografie (SEC) je separace založená na různé velikosti částic. V tomto případě se gelová filtrace používá jako skupinová separace, při níž se oddělují složky vzorku nad hranicí molekulové hmotnosti od všech složek pod ní. Proteiny větší než 5 kDa nebo oligonukleotidy delší než 10 nt nebo bp jsou příliš velké na to, aby účinně pronikly pórovou strukturou částic, a eluují se jako první. Menší složky matrice a soli pufru mohou účinněji pronikat do malých pórů v částicích, a tak zůstat na koloně.

Použítí AdvanceBio Spin kolon < 1000 µl

Centrifugační kolonky se semipreparativní stupnicí, které jsou součástí setu kat.č. 1980-1105, jsou určeny pro použití s 50 ml centrifugáčnimí zkumavkami: jedna slouží pro promývací kroky a druhá čistápro samotný odběr vzorků. Centrifugační kolonka je držena v horní části zkumavky pomocí malého bílého plastového adaptéru, jak je znázorněno na obrázku. Každé balení (kat.č. 1980-1105) obsahuje čtyři opakovaně použitelné adaptéry. Dalších osm je k dispozici jako kat.č. 1980-1106. Agilent nabízí dvě různé velikosti balení centrifugačních zkumavek: kat.č. 5610-2049, 25 ks,
a kat.č. 190065200, 500 ks.

Altium: Rychlé a efektivní čištění vzorků pro analýzu biomolekul (AdvanceBio Spin Columns).

Použití AdvanceBio Spin 96-jamkových mikrotitračních destiček

Pro vysokou propustnost vzorků v laboratoři slouží 96-jamkové mikrotitrační destičky, které umožňují provádět, jak promývání vorků, tak konečný sběr vzorků. Pro promývací kroky doporučujeme produkt kat.č. 5043-9308 a pro samotný odběr vzorků 96-jamkovou mikrotitrační destičku ve tvaru V, například kat.č. 5043-9312. Během centrifugace jsou mikrotitační destičky pro přečistění a sběr vzorků naskládány na sobě (výška 5,1 cm), je tedy nutné se ujistit, zda Vaše centrifuga je kompatibilní i pro tento formát.

AdvanceBio Webinars Series

Přehled nejnovější literatury o AdvanceBio Spin Columns od Agilent Technologies v knihovně LabRulezLCMS

• AdvanceBio Spin Columns (Manuály | 2024)

• A Quick and Efficient Sample Cleanup for Biomolecule Analysis (Aplikace | 2024)

• Improving the Quality of Antibody Drug Conjugates by Orthogonal Analytical Methods (Příručky | 2024)

• Agilent BioHPLC Columns - Your essential resource for biomolecule analysis (Brožury a specifikace | 2019)

• N-Glycan Analysis: Better Together - Agilent and ProZyme sample preparation workflow (Brožury a specifikace | 2020)

• Analysis of Lipid Nanoparticle Components Using an Agilent 6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF (Aplikace | 2024)