Analysis of Triglycerides Using the Nexera™ UC Supercritical Fluid Chromatograph

Význam tématu

Analýza triglyceridů je klíčová pro charakterizaci lipidového profilu potravin a biologických vzorků. Triglyceridy představují hlavní zdroj energie ve tkáních a jejich složení se liší podle původu a kvality olejů. Přesná identifikace a kvantifikace jednotlivých molekul umožňuje zajištění bezpečnosti potravin, sledování kvality surovin a podporu výzkumu lipidomiky.

Cíle a přehled studie

Studie si klade za cíl demonstrovat efektivitu a výkonnost superkritické fluidní chromatografie (SFC) ve spojení s hmotnostní spektrometrií (MS) při analýze řady reprezentativních triglyceridů. Autoři představují metodiku za účelem rychlé separace a detekce dvanácti typických triglyceridů včetně trilaurinu, trioleinu a tribeheninu. Dále je prověřena linearita, opakovatelnost a aplikace této metody na vzorky potravinářských olejů.

Použitá metodika a instrumentace

• Systém SFC: Nexera UC Supercritical Fluid Chromatograph
• Kolona: Shim-pack UC-GIS (150 mm × 2.1 mm, 3 μm)
• Mobilní fáze: A – CO2, B – 0,1 % formiátu amonného v metanol/IPA (3/7, v/v)
• Gradient: 5 % B (0 min) → 25 % (7 min) → 80 % (12–15 min) → 5 % (15,1–18 min)
• Proud: 1,0 mL/min, teplota kolony 40 °C, tlak 10 MPa (BPR)
• Detekce: LCMS-8050 v režimu ESI pozitivního ionizačního módu, MRM
• Makeup: 0,1 % formiát amonný v metanolu, 0,05 mL/min
• Injekční objem: 1 μL

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda umožnila separaci dvanácti triglyceridů podle délky uhlovodíkových řetězců a míry nasycení. Retenční časy vzrůstaly s délkou acylových řetězců a naopak klesaly se zvyšujícím se počtem dvojitých vazeb. Linearita kalibračních křivek v rozsahu 0,1–1000 μg/L byla vynikající (R2 ≥ 0,9974). Opakovatelnost relativních retenčních časů i velikosti píků vykázala RSD pod 0,22 % pro časy a pod 8,3 % pro plochy píků. Aplikace na vzorky rybího a sezamového oleje potvrdila schopnost metody detekovat i složité směsi lipidů s vysokou citlivostí.

Přínosy a praktické využití metody

• Vysoká rozlišovací schopnost a rychlost separace různých molekulárních forem triglyceridů
• Vynikající linearita a citlivost v širokém koncentracím rozsahu
• Opakovatelné výsledky vhodné pro kvalitativní i kvantitativní analýzu olejů
• Možnost rozsáhlé aplikace v potravinářském průmyslu, farmakologii i lipidomických studiích

Budoucí trendy a možnosti využití

Superkritická fluidní chromatografie spojená s MS se dále rozvíjí díky udržitelnějším mobilním fázím, novým typům kolonek pro lepší účinnost separace a rozšířeným metodám lipidomického profilování. Vývoj technik pro rychlé zpracování dat a automatizaci analýz přinese vyšší throughput v rutinní laboratorní praxi. Kombinace s vysokorozlišovacími hmotnostními spektrometry otevře nové možnosti pro hlubší molekulární charakterizaci komplexních lipidových směsí.

Závěr

Popsaná metoda SFC–MS pro analýzu triglyceridů nabízí spolehlivý nástroj pro rychlou separaci, citlivou detekci a spolehlivou kvantifikaci lipidů. Návrh metodiky splňuje požadavky na linearitu a opakovatelnost a je snadno aplikovatelný na reálné vzorky potravinářských olejů. Díky svým přednostem má široké uplatnění v potravinářských laboratořích, výzkumu i kontrole kvality.

Reference

• H. Terada, T. Hattori, Analysis of Triglycerides Using the Nexera UC Supercritical Fluid Chromatograph, Shimadzu Application News No. C189, May 2019.
• Shimadzu Corporation, Nexera UC Supercritical Fluid Chromatograph and LCMS-8050 Technical Manuals.