Application using Analytical / Preparative LC-MS System (Part 1)

Význam tématu

Preparativní a analytická LC-MS integrace umožňuje rychlou a efektivní separaci, identifikaci a izolaci cílových sloučenin bez zbytečné ztráty vzorku. Tento přístup šetří čas, materiál i náklady a zvyšuje reprodukovatelnost výsledků v akademickém i průmyslovém prostředí.

Cíle a přehled studie

Studie se zaměřuje na:

• Propojení paralelních analytických a preparativních LC systémů do jednoho pracovního postupu.
• Ukázku řízení celého procesu pomocí webové aplikace PsiPort Browser.
• Demonstraci na modelových sloučeninách kofein a theofylin s cílem porovnat analytické a preparativní separace.

Použitá metodika

Obě cesty (analytická i preparativní) využívají sloupce stejné náplně (Gemini C18) a stejnou lineární rychlost. Analytická část běží při 0,2 mL/min na kolóně 50×2,0 mm, preparativní při 20 mL/min na kolóně 50×21,2 mm. Mobilní fáze: voda/ACN (75/25) s 0,1 % kyseliny mravenčí. Frakcionace probíhá po běžném analytickém ověření přítomnosti cílových sloučenin.

Použitá instrumentace

• Pumpy LC-20AD (analytická) a LC-8A (preparativní)
• Mixery pro smíchání mobilních fází
• Autosampler SIL-20AC (analytický) a Gilson 215 (preparativní)
• Frakční kolektor
• Prep LCMS-2010EV (ESI+, m/z 100–500, split 1:500)
• PDA detektor SPD-M20A a UV detektor SPD-20A

Hlavní výsledky a diskuse

Retenční časy theofylinu (2,07 min) a kofeinu (2,87 min) byly konzistentní na analytické i preparativní úrovni. Masové spektrum (MS) i UV/PDA signály potvrdily vysokou čistotu frakcí. Převedení analytických podmínek na preparativní formát proběhlo bez ztráty rozlišení.

Přínosy a praktické využití metody

Integrace obou systémů:

• Zkracuje dobu vývoje metody a nasazení frakcionace.
• Snižuje spotřebu cenných vzorků.
• Umožňuje snadné a centralizované ovládání bez nutnosti hlubokých zkušeností s preparativní chromatografií.

Budoucí trendy a možnosti využití

Rostoucí poptávka po automatizaci a on-line monitorování povede k dalšímu rozvoji cloudového řízení, aplikaci umělé inteligence pro optimalizaci gradientů a rozšíření rozsahu preparativních aplikací v oblasti farmacie, biotechnologie či environmentální analýzy.

Závěr

Popsaný paralelní LC-MS systém s jednotným softwarovým rozhraním zefektivňuje přechod od analytické metody k preparativní isolaci. Díky shodnému nastavení mezí kolony a lineární rychlosti je dosaženo konzistentních výsledků a minimalizováno plýtvání vzorkem.