ClinSpec Immunosuppressant Drugs Kit

Význam tématu

Imunoadresivní léky jako takrolimus, sirolimus, everolimus a cyklosporin A hrají klíčovou roli při potlačení imunitní odpovědi u pacientů po transplantacích nebo s autoimunitními onemocněními. Přesná a spolehlivá kvantifikace těchto látek v celkové krvi je zásadní pro optimalizaci dávek, prevenci toxicity a zajištění terapeutické účinnosti. Vědecké postupy založené na kapalinové chromatografii spojené s hmotnostní spektrometrií (LC/MS) umožňují vysokou citlivost, selektivitu a robustnost analýzy, což je nezbytné pro výzkum i rutinní laboratorní praxi.

Cíle a přehled studie / článku

Popis produktu ClinSpec™ Immunosuppressant Drugs Kit, určeného výhradně pro výzkumné účely a určeného k:

• kvantitativní analýze čtyř hlavních imunosupresiv v celkové krvi,
• zajištění lineární odezvy v potřebném rozsahu koncentrací obvyklých v terapeutickém monitoringu,
• poskytnutí sady kalibrátorů, interních standardů a kontrolních vzorků pro validaci a kontrolu kvality měření.

Použitá metodika a instrumentace

Pro přípravu vzorku je použita proteinová precipitace:

• Odběr 50 µl vzorku celkové krve.
• Přidání 150 µl roztoku obsahujícího interní standardy (Ascomycin pro takrolimus, sirolimus, everolimus; cyklosporin D pro cyklosporin A).
• Vortexování a následné promíchání po dobu 30 min.
• Centrifugace po dobu 10 min při 13 200 rpm.
• Odběr supernatantu 50 µl pro injekci.

Analytická separace a detekce:

• Kapalinová chromatografie v kombinaci s tandemovou hmotnostní spektrometrií (Triple Quadrupole LC/MS/MS).
• Volitelně vysokorozlišovací systém Exactive pro výzkumné aplikace.

Hlavní výsledky a diskuse

Kit poskytuje šestistupňovou sadu kalibrátorů pro každý z analyzovaných imunosupresiv v rozmezí 1–50 ng/ml (pro cyklosporin A až do 2000 ng/ml), trojici kontrolních vzorků (3–30/12–125/30–375 ng/ml) a navíc vysokou hladinu kontroly cyklosporinu A (750 a 1500 ng/ml). Taková konstrukce kalibrační křivky umožňuje:

• spolehlivou kvantifikaci v terapeutickém rozsahu,
• ověření přesnosti a opakovatelnosti ve více hladinách QC,
• zajištění robustness metody v různých maticích celkové krve.

Diskuse se zaměřuje na význam interních standardů pro kompenzaci variačních efektů přípravy vzorku a ionizačních podmínek v MS.

Přínosy a praktické využití metody

Implementace ClinSpec™ sady v laboratoři přináší:

• standardizovaný pracovní postup pro výzkumné měření imunosupresiv,
• zkrácení času přípravy vzorku díky jednoduchému protokolu precipitace,
• možnost validace metody v souladu s OECD, FDA či EMA guidelines,
• vysokou reprodukovatelnost díky předmíchání interních standardů.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další směřování analytiky imunosupresiv zahrnuje:

• automatizaci přípravy vzorků pro vysokopropustné platformy,
• rozšíření panelu analyzovaných látek o další imunosupresiva či metabolity,
• aplikaci umělé inteligence pro predikci dávkovacích schémat na základě kinetických modelů,
• využití vysoce rozlišovacích MS systémů pro vzdálené a telemedicínské analytické služby.

Závěr

ClinSpec™ Immunosuppressant Drugs Kit představuje komplexní řešení pro kvantitativní výzkumnou analýzu klíčových imunosupresiv v celkové krvi. Díky standardizovaným kalibrátorům, interním standardům a kontrolním vzorkům umožňuje robustní, citlivé a reprodukovatelné stanovení, které podporuje kvalitu dat a zrychluje výzkumné i vývojové procesy v oblasti transplantační medicíny a farmakokinetiky.

Reference

Žádné uvedené reference.