Screening and Quantification of Multiple Drugs in Urine Using Automated Online Sample Preparation and Tandem Mass Spectrometry

Význam tématu

Analýza léčiv a jejich metabolitů v moči je klíčová pro toxikologii, klinický výzkum i kontroly dodržování léčebných režimů. Moderní LC-MS/MS s automatizovanou přípravou vzorku umožňuje rychlé, citlivé a přesné stanovení desítek sloučenin v komplexních matricích. TurboFlow™ technologie minimalizuje ruční manipulaci, potlačuje iontovou supresi a zkracuje dobu analýzy.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem této studie bylo vyvinout devítiminutový analytický protokol pro kvantifikaci 30 léčivých látek a jejich metabolitů v lidské moči. Metoda integruje online vzorkovací systém Transcend™ s TurboFlow® kolonkou a následnou separací na PFP fázích, přičemž kvantifikace probíhá na TSQ Quantum Access MAX triple kvadrupólu.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek: 100 µL moči bylo naředěno 100 µL methanolu s osmi deuterovanými vnitřními standardy (např. nicotine-d4, cotinine-d4, midazolam-d4 atd.). Po vortexu a centrifugaci se 10 µL supernatantu injektovalo na TurboFlow Cyclone MAX kolonu (0,5 x 50 mm).
Chromatografie: Transcend™ systém, analytická kolona Hypersil GOLD PFP (100 x 2,1 mm, 5 µm), gradientní eluce s celkovou dobou analýzy 9 minut.
Hmotová spektrometrie: TSQ Quantum Access MAX s Ion Max ESI zdrojem. Pro každý analyzát byly monitorovány dva SRM přechody se skenovací dobou 10 ms.

Hlavní výsledky a diskuse

Metoda prokazuje lineární kalibrační křivky v rozmezí 1–1000 ng/mL (u 14 látek), 5–1000 ng/mL (9 látek), 10–1000 ng/mL (5 látek) a 50–1000 ng/mL (2 látky). Limity kvantifikace se pohybují mezi 1 a 50 ng/mL. Vnitrodenní i mezidení preciznost (%RSD) pro nejnižší QC úroveň nepřekročila 18 %. Chromatogramy nízké kalibrační úrovně vykazují dobré rozlišení všech analytů v čase 1,5–5 minut.

Přínosy a praktické využití metody

Rychlá a robustní online příprava vzorku eliminuje tradiční offline extrakci, zkracuje dobu analýzy a zvyšuje reprodukovatelnost. Metoda je vhodná pro vysoce propustné laboratorní provozy, klinické studie a forenzní toxikologii.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj může zahrnovat rozšíření spektra sledovaných látek, integraci s vysokorozlišovacími hmotovými spektrometry či plně automatizované nástupy vzorků v kombinaci s inteligentními algoritmy pro zpracování dat a prediktivní monitoring.

Závěr

Vyvinutá LC-MS/MS metoda s TurboFlow technologií nabízí rychlý, citlivý a přesný přístup ke kvantifikaci širokého spektra léčiv v moči. Technologie zjednodušuje přípravu vzorků, šetří čas a zajišťuje vysokou kvalitu výsledků.

Reference

• Barbora Brazdova, Marta Kozak. Screening and Quantification of Multiple Drugs in Urine Using Automated Online Sample Preparation and Tandem Mass Spectrometry. Thermo Fisher Scientific, 2010, Application Note AN63200_E.