Method Development of NDMA and NDEA Quantification in Sartan Drug by LC-MS/MS

Význam tématu

Genotoxické nečistoty NDMA a NDEA v léku Sartan mohou představovat závažné zdravotní riziko. Regulace vyžadují citlivou a spolehlivou metodu pro detekci stopových hladin těchto látek.

Cíle a přehled studie

Cílem bylo vyvinout rychlou, citlivou a robustní UHPLC-MS/MS metodu pro kvantifikaci NDMA a NDEA ve farmaceutických surovinách valsartanu a irbesartanu pomocí přístroje Agilent Ultivo LC/TQ.

Použitá metodika a instrumentace

• Vzorkování: 100 mg látky, přidání 200 µL vnitřního standardu v metanolu, 300 µL metanolu a 9,5 mL vody, extrakce vortexem a ultrazvukem, centrifugace, filtrace.
• Kapalinová chromatografie: Agilent 1290 Infinity II UHPLC, kolona ZORBAX Eclipse Plus C18 (3,0×100 mm, 1,8 µm), fáze A 0,1 % HCOOH ve vodě, fáze B metanol, gradient 5 % B (0–3 min)→60 % B (3–8 min)→95 % B (9–15 min), tok 0,5 mL/min, injekce 20 µL.
• MS/MS: Agilent Ultivo LC/TQ s APCI pozitivním, teplota plynu 300 °C, tok 6 L/min, nebulizace 45 psi, APCI topení 350 °C, korona 8 µA, napětí 2000 V, MRM přechody pro NDMA, NDEA a jejich deuterované standardy.

Hlavní výsledky a diskuse

• Chromatografie: symetrické vrcholy a dobré oddělení od API, přepnutí vysokých koncentrací API do odpadu.
• Citlivost: LOD 20 ng/L pro NDMA a 5 ng/L pro NDEA, LOQ odpovídá 50 ng/L a 10 ng/L.
• Přesnost: RSD < 10 % při čtyřech úrovních (0,1–100 ng/mL).
• Linearita: rozsah 0,1–300 ng/mL, R2 = 0,998 pro NDMA a 0,997 pro NDEA, pokrytí 0,01–30 mg/kg v léku.
• Recovery: 91–97 % se 3–4 % RSD ve valsartanu a irbesartanu při 1 mg/kg spike.

Přínosy a praktické využití metody

Metoda umožňuje spolehlivou detekci a kvantifikaci genotoxických nečistot v souladu s FDA, EDQM a Čínskou farmakopejí, s jednoduchou přípravou vzorku a vysokou robustností přístroje.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Rozšíření na další genotoxické a nebezpečné nečistoty.
• Automatizace přípravy vzorků a inline monitoring během výroby.
• Vývoj miniaturizovaných a přenosných systémů LC-MS/MS.
• Implementace do QA/QC procesů v průmyslové výrobě léčiv.

Závěr

Agilent Ultivo LC/TQ představuje rychlou, citlivou a přesnou UHPLC-MS/MS metodu pro kvantifikaci NDMA a NDEA v sartanových lécích, splňující přísné regulační požadavky.

Reference

1. Direct Injection N-Nitrosodimethylamine (NDMA) and N-Nitrosodiethylamine (NDEA) Impurity Assay by GC/MS. U.S. FDA.
2. Test method for the determination of NDMA and NDEA by LC-MS/MS in Sartan containing film coated tablets. Council of Europe EDQM.
3. Valsartan (monographs). Pharmacopoeia of China (2015 Edition), Volume II, str. 1547.