Improving Peak Shape Using the Automatic Pretreatment Function (Co-Injection) in the SIL-40 Series Autosamplers

Význam tématu

V kapalinové chromatografii (LC) může silná vzorková fáze negativně ovlivnit tvar špiček a tím i přesnost kvantifikace. Tento problém je zvláště patrný u reverzní fáze při analýze vzorků s vysokým podílem organického rozpouštědla, například u lipidových mediatorů. Úprava tvaru špiček je klíčová pro spolehlivou práci v oblastech biomarkerů, farmakologie a QA/QC v průmyslové analytice.

Cíle a přehled studie / článku

Cílem technické zprávy je představit automatizovanou funkci ko-injekce (co-injection) v autosamplerech SIL-40 (řada Nexera) a ukázat, jak lze současným vstřikováním slabšího elučního rozpouštědla zlepšit tvar špiček a rozlišení rychle eluovaných látek.

Použitá metodika a instrumentace

Analýza lipidových mediatorů byla prováděna reverzně-fázovou LC/MS/MS s použitím C8 kolony (2,1 mm × 150 mm, 2,6 µm). Mobilní fáze A byla 0,1 % vodný roztok kyseliny mravenčí, fáze B acetonitril. Vzorky standardního roztoku lipidů byly připraveny v 100 % methanolu. Ko-injekce vody (5, 10 a 15 µL) probíhala přesně dle nastavení v softwaru LabSolutions.
Instrumentace

• Autosampler SIL-40 series (Nexera)
• Řídící software LabSolutions
• LC/MS/MS metoda package pro lipid mediátory
• C8 kolona: 2,1 mm I.D. × 150 mm L, 2,6 µm

Hlavní výsledky a diskuse

Ko-injekce vody významně zlepšila tvar špiček i faktory ocasení (USP tailing factor S) u rychle eluovaných lipidů. Například u tetranor-PGDM se S zvýšilo z 0,69 bez ko-injekce na 1,07 při 15 µL vody. Rozlišení izomerů (Rs) vzrostlo z hodnot kolem 1,8 na více než 2,4 při 15 µL ko-injektované vody.

Přínosy a praktické využití metody

Automatizovaná ko-injekce umožňuje snadné vkládání doplňkového rozpouštědla přímo v autosampleru bez manuálních zásahů. Zlepšení tvaru špiček přispívá k vyšší spolehlivosti kvantitativních výsledků a lepšímu rozlišení složitých vzorků, což je výhodné v biomarkerových studiích i v rutinní kvalitativní a kvantitativní analýze.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další vývoj může směřovat k automatickému výběru optimálního ko-injektantu na základě retenčních charakteristik vzorku, integrované optimalizaci objemů a směsi rozpouštědel či rozšíření na další chromatografické modality, například HILIC či iontovou výměnu.

Závěr

Funkce automatické ko-injekce v autosamplerech SIL-40 ukázala schopnost výrazně zlepšit tvar špiček a rozlišení při LC/MS analýze lipidových mediatorů. Jednoduchá konfigurace v softwaru LabSolutions výrazně zefektivňuje pracovní postupy v analytických laboratořích.

Reference

Shimadzu Corporation. Improving Peak Shape Using the Automatic Pretreatment Function (Co-Injection) in the SIL-40 Series Autosamplers. Technical Report C190-E240. First Edition: August, 2019.