Let Your Autosampler Do Your Pipetting

Význam tématu

Automatizace přípravy kalibračních roztoků pomocí autosampleru eliminuje zdlouhavé a chybám náchylné manuální pipetování. V praxi to vede k úsporám času, snížení nákladů a zlepšení reprodukovatelnosti výsledků bez závislosti na pracovních dovednostech operátora.

Cíle a přehled studie / článku

Technický přehled popisuje využití injektorového programu v autosamplerech Agilent 1260 Infinity II Vialsampler a Multisampler pro sériové 5násobné ředění a přípravu kalibrací i standardních ředění pro odhad LOD a LOQ. Součástí je srovnání výsledků automatického a manuálního přístupu na modelové sloučenině kofeinu.

Použitá metodika

Postup přípravy kalibrací zahrnuje:

• Definici sekvence kroků v injektorovém programu (odsátí diluentu, odsátí vzorku, promytí jehly, vystřiknutí směsi do nové vialky).
• Sériová pětinásobná ředění sedmkrát za sebou s využitím 100 µl nebo 900 µl analytické hlavy a smyčky.
• Opakování cyklu s postupným přemísťováním vzorků a diluentu do dalších vialek.
• Analýza připravených kalibrací na LC metodě s gradientním elučním programem a detekcí UV při 273 nm.

Použitá instrumentace

• Agilent 1260 Infinity II Prime LC System: Flexible Pump G7104C
• Vialsampler G7129C nebo Multisampler G7167A s 100 µl hlava + 100 µl smyčka, volitelně 900 µl hlava + 900 µl smyčka
• Multicolumn Thermostat G7116A, Diode Array Detector HS G7117C (InfinityLab Max-Light buňka 10 mm)
• Software Agilent OpenLab CDS v2.3
• Kolony Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 (2.1×50 mm, 2.7 µm a 4.6×50 mm, 2.7 µm)
• Acetonitril LC kvality, ultrapure voda z Milli-Q systému, kofein standard Sigma-Aldrich

Hlavní výsledky a diskuse

Kalibrace kofeinu v rozsahu 0,006–20 µg/mL připravené autosamplerem vykázaly výbornou linearitu (R2 ≥ 0,99999) a srovnatelné kalibrační funkce s manuálně připravenými roztoky. Deviation kontrolního vzorku činila jen 0,7–1,1 %. Pomocí sériových ředění bylo odhadnuto LOD na 0,001 µg/mL (S/N ≈ 2,5).

Přínosy a praktické využití metody

• Minimalizace pipetovacích chyb a variability mezi operátory
• Úspora času a pracovní síly při přípravě vícečetných standardů
• Standardizace a validace ředicích postupů pro QC/QA laboratoře
• Přímé propojení s analytickou sekvencí bez manuálních zásahů

Budoucí trendy a možnosti využití

Automatizovaná ředění lze rozšířit na další typy autosamplerů a analytických metod (UHPLC, MS). V budoucnu se očekává integrace s robotickými systémy, microfluidními čipy a softwarovým řízením pomocí umělé inteligence pro optimalizaci ředicích protokolů a autonomní monitoring kvality.

Závěr

Injektorový program autosamplerů Agilent 1260 Infinity II umožňuje spolehlivou a účinnou přípravu kalibrací i standardních ředění. Metoda poskytuje vynikající linearitu, reprodukovatelnost a minimalizuje závislost na manuálních dovednostech, což významně zvyšuje efektivitu a kvalitu analytických prací.

Reference

1. ICH Q2(R1): Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology, International Conference on Harmonisation, October 1994.